二胡定音的准确与否同演奏效果有很大关系，二胡采用五度定音，一般用泛音进行调弦，“D、A定音”是二胡的标准定音。
    二胡的音定得是否准确或高度是否适宜将直接关系着拉奏效果的顺利进行。所谓定音，就是利用琴轴装置把内外两根弦的音高分别固定下来。二胡一般都是采用五度定音。
    很多乐器一般都采用泛音来调弦，二胡也不例外，利用泛音来校正二胡的五度定音，不但可保证五度定音的准确度，而且还能提高我们的辨音能力。
    根据二胡本身的性能特点来，为了能最大限度地求得二胡的共鸣，一般来说，内弦音高可把握在绝对音高“g—d‘”之间的任何一个高度上，外弦音高也就相应的定在“d‘一a’”之间。即内弦定为“g”，外弦也就定为“d‘”，内弦定为“A”，外弦也就定为“e’”等等。这个范围的定音高度，不失二胡那样浑厚圆润而又清澈明亮的发音特色。
    如果是伴奏歌唱，除了要考虑如何保持二胡的发音特色外，还要考虑适合发挥歌唱者的嗓音性能。例如给男低音伴奏，二胡的音高就应比男低音的嗓音高一个八度。对于歌曲中的“调号”（即“1—C”、“1。‘E”等）。我们仅把它作为定音的参考依据。每个歌唱者的嗓音情况都不一样，如果用二胡伴奏，考虑怎样定音，就要叫歌唱者先唱一唱，借此掌握住歌唱者声区音域。一般地说，利用歌唱者的最低音来作二胡的内弦定音，是最有利于歌唱者嗓音性能的充分发挥的。
    如果是登台作独奏、齐奏表演或参加乐队合奏，二胡的定音便要采用统一规定的“D、A定音”，人们常把“D、A定音”看作是二胡的标准定音。